Oporność na tyreotropinę wywołaną przez mutacje w genie receptora tyreotropiny ad 5

Niższy żel pokazuje zmutowany allel zawierający guaninę w pozycji 583 znalezionej u matki i jej trzech córek, która jest trawiona Mwol, aby wytworzyć 79-bp fragment DNA (M2), jak również allel zawierający cytozynę zwykle znajdujący się na pozycji 583, który jest odporny na trawienie (M1). Rodowód powyżej żeli pokazuje wzór dziedziczenia zmutowanych alleli receptora tyreotropiny. Marker wielkości DNA () strawiono HaIII. Potwierdziliśmy obecność tych samych podstawień nukleotydowych u wszystkich trzech dziewcząt. Ponadto wyśledziliśmy każdy z dwóch zmutowanych alleli do odpowiedniego rodzica (ryc. Continue reading „Oporność na tyreotropinę wywołaną przez mutacje w genie receptora tyreotropiny ad 5”

Oporność na tyreotropinę wywołaną przez mutacje w genie receptora tyreotropiny czesc 4

Wzrost dziewcząt nadal był normalny. Tabela 2. Tabela 2. Odpowiedzi na administrację T3 w najstarszej córce (córka 1) w rodzinie z opornością na tyyropinę i dziewięciu normalnych podmiotów. Wyniki podawania dwóch dawek T3 najstarszej córce przedstawiono w Tabeli 2. Continue reading „Oporność na tyreotropinę wywołaną przez mutacje w genie receptora tyreotropiny czesc 4”

Oporność na tyreotropinę wywołaną przez mutacje w genie receptora tyreotropiny cd

Startery zaprojektowano tak, aby produkt amplifikacji tworzył unikalne miejsce restrykcyjne tylko w obecności wariantu nukleotydu (metoda swoistego dla allelu specyficznego dla alleli trawienia endonukleazą) .11,12 Po powieleniu genomowego DNA osobników przez PCR, fragmenty DNA strawiono odpowiednimi enzymami, a następnie poddano elektroforezie w 3% żelu agarozowym NuSieve-1%. Częściowe odcięcie produktów PCR wskazuje, że zmutowany nukleotyd był obecny w jednym z dwóch alleli.
Konstrukcja wektorów ekspresji cDNA receptora tyreotropiny receptora dzikiego i zmutowanego
Pełnej długości cDNA receptora tyreotropowego typu dzikiego sklonowano w pSVL.13. Odpowiednie fragmenty DNA niosące każdą mutację i polimorfizm zidentyfikowany u pacjentów zastąpiono w celu wytworzenia wektorów eksprymujących alaninę w pozycji 162 (Ala162), treoniny w pozycji 52 i alaniny w pozycja 162 (Thr52-Ala162) i asparagina w pozycji 167 (Asn167). Ostateczne konstrukty zweryfikowano przez sekwencjonowanie. Continue reading „Oporność na tyreotropinę wywołaną przez mutacje w genie receptora tyreotropiny cd”

Oporność na tyreotropinę wywołaną przez mutacje w genie receptora tyreotropiny ad

Trzy dziewczynki rozwijały się normalnie bez zmiany swoich dawek T4, które w czasie naszego badania były niższe niż zwykła dawka zastępcza (Tabela 1). Wyniki badań czynności tarczycy u trzech dziewczynek przed 3, 6 i 12 miesiącami po odstawieniu terapii T4 oraz u ich rodziców przedstawiono w Tabeli 1. Dodatkowe badania w najstarszej dziewczynce przeprowadzone dwa miesiące po T4 przerwane ujawniło stężenie podjednostki . hormonu glikoproteiny w surowicy wynoszące 0,6 .g na litr (normalne, <1,0) i brak przeciwciał przeciwtiprotropowych w surowicy, jak określono przez wiązanie radioznakowanej tyreotropiny do immunoglobulin w surowicy. Stężenie tyreotropiny w surowicy wzrosło z 66 mU na litr do maksimum 338 mU na litr 15 minut po dożylnym podaniu 400 .g hormonu uwalniającego tyreotropinę. Continue reading „Oporność na tyreotropinę wywołaną przez mutacje w genie receptora tyreotropiny ad”